柱壓過高是HPLC柱用戶*常碰到的問題。其原因有多方面,而且常常并不是柱子本身的問題,您可按下面步驟檢查問題的起因。
1拆去保護柱,看柱壓是否還高,否則是保護柱的問題,若柱壓仍高,再檢查;2把色譜柱從儀器上取下,看壓力是否下降,否則是管路堵塞,需清洗,若壓力下降,再檢查。
3將柱子的進出口反過來接在儀器上,用10倍柱體積的流動相沖洗柱子,(此時不要連接檢測器,以防固體顆粒進入流動性)。這時,如果柱壓仍不下降,再檢查;
4更換柱子入口篩板,若柱壓下降,說明你的溶劑或樣品含有顆粒雜質(zhì),正是這些雜質(zhì)將篩板堵塞引起壓力上升。若柱壓還高,請與廠商聯(lián)系。一般情況下,在進樣器與保護柱之間接一個在線過濾器便可避免柱壓過高的問題,SGE提供的Rheodyne 7315型過濾器就是解決這一問題的*佳選擇。
我補充幾點:
1:柱壓過高時檢測的基本原理就是順著路線走向檢查各個“路口”,包括從流動相走出的通路,三通,兩通都要檢查,因為如果曾經(jīng)使用過緩沖溶液和鹽做流動相,沒有維護好的話,會對各個通路造成影響,極有可能腐蝕有些零件中的小附件,比如一些墊片,需要及時更換;
2:檢測柱子的話,有些朋友都回答了很多了,我就補充一點,如果發(fā)現(xiàn)是預(yù)柱堵的話,可以用超聲(加純乙醇,甲醇)一段時間,可以恢復(fù)
至于能不能用純水沖洗,應(yīng)該由柱子決定,影響柱壓的*基本因素就是流動相的粘度,純物質(zhì)的粘度*低,但是一般不建議用純水常時間沖洗,用高濃度有機相較好。柱子使用完畢也應(yīng)該按照說明書的用純?nèi)軇┍4妗?/span>
3:如果確定柱子沒有問題,是系統(tǒng)的問題,就需要用純水常時間沖洗一下系統(tǒng)
4:柱子和系統(tǒng)都沒有問題的話,就是檢測器的問題,很有可能是檢測池堵了,嘗試一下不接柱子,光連檢測器看看,就會發(fā)現(xiàn)了。如果是檢測池堵了,那按照你檢測池的說明,一個一個零件卸下來,有順序的,而且要非常小心,一個不小心,你就裝不回去了。把可以清洗的部件超聲一下。有些象石英之類的是不能超聲的!
5:*后也是*慘的,就是你的檢測器壞了,或者到了使用的壽命了,也會出現(xiàn)莫明其妙的不正常柱壓!
注意樣品的處理,以及流動相的處理,其次就是如果你的柱子原來是甲醇或乙腈保存,現(xiàn)在要用含緩沖鹽流動相,應(yīng)該先用乙腈/水(15/85)或甲醇/水(15/85)類似比例沖柱子,短柱20~30分鐘,長柱40分鐘以上,然后在走流動相,不然,想想看,結(jié)果柱壓也是一樣越來越高的。